凝膠法是一種基于鱟試劑中的多個(gè)酶蛋白在模擬的生理環(huán)境下進(jìn)行的反應(yīng)，所以在反應(yīng)過程中會(huì)受到很多生化因素的影響。此外，由于內(nèi)毒素本身的特性決定了容易被吸附和集聚，所以采用凝膠法進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢查時(shí)只有很少的非腸道用藥沒有干擾可直接檢查，大部分藥物存在干擾。因此，消除干擾因素的影響對(duì)于使用鱟試劑凝膠法檢查細(xì)菌內(nèi)毒素顯得十分必要。

一、凝膠法干擾類型

凝膠法鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)受諸多因素干擾，主要有二大類：抑制型干擾、增強(qiáng)型干擾。在進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢查時(shí)，當(dāng)供試品含有的內(nèi)毒素濃度≥2倍檢測(cè)試劑的靈敏度，但檢測(cè)結(jié)果仍為陰性時(shí)，即為抑制型干擾，抑制型干擾的結(jié)果表現(xiàn)為“假陰性"；當(dāng)供試品含有的內(nèi)毒素濃度低于檢測(cè)試劑靈敏度的1/2，但檢測(cè)結(jié)果仍為陽(yáng)性時(shí)，即為增強(qiáng)型干擾，增強(qiáng)型干擾的結(jié)果表現(xiàn)為“假陽(yáng)性"。

二、凝膠法干擾機(jī)制

（一）抑制型干擾

1、pH的影響

鱟試劑與內(nèi)毒素的反應(yīng)是一個(gè)復(fù)雜的酶促反應(yīng)，因此其反應(yīng)的介質(zhì)要求有合適的pH，最佳 pH范圍為6~8。為保證反應(yīng)介質(zhì)合適的pH，鱟試劑必須具有一定的pH緩沖能力。但有些檢品本身要求在酸性或堿性的介質(zhì)中保存，且自身也具有一定的pH緩沖能力，對(duì)這類檢品進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢查時(shí)，鱟試劑的pH緩沖能力就不足以使反應(yīng)介質(zhì)的pH緩沖到最佳范圍，會(huì)使反應(yīng)受到干擾，通常表現(xiàn)為抑制作用。

2、內(nèi)毒素修飾

內(nèi)毒素是一個(gè)具有親水，疏水兩個(gè)區(qū)域的兩性分子，這種結(jié)構(gòu)使內(nèi)毒素分子間或內(nèi)毒素分子與檢品中成分結(jié)合形成微室，內(nèi)毒素的分散性是由脂質(zhì)A形成高分子聚合物的功能和多糖與陽(yáng)離子靜電引力決定的，當(dāng)內(nèi)毒素分子的聚集增加，內(nèi)毒素的鱟反應(yīng)性和熱原性都顯著下降，通常檢品中離子強(qiáng)度的較大提高會(huì)引起內(nèi)毒素的聚集和回收率降低。

3、容器效應(yīng)

內(nèi)毒素稀釋液貯存一段時(shí)間后會(huì)被破壞而失活，即使經(jīng)充分的旋渦混合也不能恢復(fù)，其中可能有多種干擾因素，但容器效應(yīng)是其中一個(gè)因素。

容器效應(yīng)與接